Author: Mika Huang Date: February 14, 2023
不同来源的的细胞外囊泡,在尺寸、形态和生化特性等方面存在着巨大的差异性。对细胞外囊泡在单颗粒水平进行表征,对于深入研究囊泡运输系统、细胞通讯机制以及疾病的早期诊断和治疗等均具有非常重要的意义。另外,为了验证细胞外囊泡的颗粒粒径分布是否具有临床价值,需要对其粒径分布进行重复分析。
纳米流式检测仪可以在单颗粒水平对细胞外囊泡进行无标记的逐一分析。使用二氧化硅纳米颗粒作为粒径测量的标准品,利用一系列粒径已知(经TEM表征)的二氧化硅纳米颗粒的混合物,建立散射光强度与颗粒粒径的标准工作曲线,即可将同等采样条件下细胞外囊泡的散射光强度转换为颗粒粒径。另外,通过检测特定时间内已标定浓度的荧光微球的个数,快速得到特定进样压力下样品流的体积流量,即可得到在相同进样压力条件下待测样品的颗粒浓度。
图1. 不同方法对二氧化硅纳米颗粒表征结果的对比
图2. 不同分析方法对同一细胞外囊泡样品粒径的表征结果
图3. 细胞外囊泡的颗粒浓度分析
利用浓度已知的荧光纳米颗粒作为浓度标准品,发展了细胞外囊泡的颗粒浓度快速测定的内标方法。
ACS Nano, 2018, 12(1), 671-680.